国产三级精品三级在线观看,丁香花在线视频完整版,日本电影丰满岳乱妇中字,妖小槡bbbb槡bbbb槡

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠(chéng)信促進(jìn)發(fā)展,實(shí)力鑄就品牌
服務(wù)熱線:

18102086003

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇常見問題!

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇常見問題!

發(fā)布時(shí)間: 2023-12-05  點(diǎn)擊次數(shù): 830次

 

 

凍存細(xì)胞一般常用胎牛血清(FBS)和二甲基亞砜(DMSO)。血清是維持細(xì)胞生存環(huán)境;DMSO是冷凍保護(hù)劑,使細(xì)胞免受低溫冰晶形成、及滲透壓改變而導(dǎo)致的物理?yè)p傷;

細(xì)胞培養(yǎng)理論上基本建議的是兩種:70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%胎牛血清或者10%DMSO+ 90%胎牛血清 。

但經(jīng)過有些實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過對(duì)比發(fā)現(xiàn):"10%的DMSO,90%的血清"復(fù)蘇效果相對(duì)比"70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%血清"好。

 

 

DMSO產(chǎn)品咱就不多說了,什么品牌都有,只要是選擇細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的,效果應(yīng)該差不多。不過我用的是MP Biomedicals二甲基亞砜(DMSO),效果還可以。

對(duì)于胎牛血清的選擇就要相對(duì)謹(jǐn)慎了,市面上胎牛血清品牌可以說是魚龍混雜,剛看過新聞的客戶就會(huì)知道,高仿產(chǎn)品橫行。慎重起見,給大家推薦CellMax品牌胎牛血清,目前有澳洲血清(庫(kù)存緊張)和中國(guó)血源胎牛血清可供大家試用,購(gòu)買。

 

 

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇需要注意哪些呢?

 

 

1、細(xì)胞本身的狀態(tài)

一般情況下細(xì)胞的復(fù)蘇還與原代細(xì)胞的活性有關(guān),如果要凍存的細(xì)胞懸液本身活性不高的話,后面復(fù)蘇的存活率也不高。

 

2、凍存細(xì)胞數(shù)量要足夠

無論你再怎么小心,細(xì)胞在冷凍和復(fù)蘇的時(shí)候都是最脆弱的,總會(huì)死掉一批。所以,一開始就要保證凍存細(xì)胞的數(shù)量足夠。

 

3、慢凍快融

一般情況下,細(xì)胞凍存時(shí)要遵循“慢凍快融"的原則。標(biāo)準(zhǔn)的降溫速度是1-2℃/min ,當(dāng)溫度到達(dá)-25℃,降溫速度可加快至5-10℃/min,到-80℃可直接入液氮。有些實(shí)驗(yàn)室是梯度凍存:4度,-20,-80,液氮,依次凍存。而復(fù)蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來之后,迅速放在37°C水浴中,盡快融化

 

4、注意安全

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)里面最容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作,注意戴保護(hù)眼鏡和手套。注意:復(fù)蘇的時(shí)候,在水浴中搖搖動(dòng)的時(shí)候會(huì)有爆炸的可能性。另外, DMSO是有毒致癌的。接觸的時(shí)候務(wù)必要帶好手套。

 

5、做好標(biāo)記

對(duì)于凍存細(xì)胞,一定要做好標(biāo)記。如:細(xì)胞名稱、代數(shù)和凍存日期。特別是公共實(shí)驗(yàn)室,更要做好標(biāo)記,避免找不到自己的細(xì)胞。

 

6、DMSO是否去除

由于DMSO是一種有毒致癌物質(zhì)。那么,解凍之后,應(yīng)不應(yīng)該去除凍存液中的DMSO呢?答案是no。除了極少數(shù)特別注明的對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞外,99%的細(xì)胞都不需要去除DMSO。后面細(xì)胞培養(yǎng)中頻繁換液會(huì)慢慢去除掉DMSO。

 

 

聯(lián)


精品国产乱子伦一区二区三区| 白丝爆浆18禁一区二区三区| 99热在线观看| 亚洲精品久久久久无码精品 | 国产亚洲精品久久久久久小舞| 看同性男aa片| 野外被三个男人躁一夜小说| 人妻丰满熟妇av无码区app| 亚洲欧洲vat| 99久久精品费精品国产| 亲胸揉胸膜下刺激娇喘视频免费| 被三个男人躁一夜好爽小说| 日本奶水milkjapan挤奶| 丰裕纵满的杨玉环中字| 玩弄老太婆bbw视频| bdsm最惨刺激fisting| 刑警娇妻穿着乳环被调教| 亚洲日韩精品一区二区三区| 日本大但人文艺术| 老板办公室乳摸gif动态图| 日本无翼乌邪恶大全彩h下拉式| 满清十大酷刑在线观看| 午夜无码乱码在线观看| 永久免费观看国产裸体美女| 精品国模一区二区三区| 欧美日本免费一区二区三区| 50岁女人连着五六次高潮| 律师的小秘书1v1h| 精品国产丝袜黑色高跟鞋| 亚洲熟妇av一区二区三区宅男| 潘金莲全集1一5集正版| 国产精品第一页| 成人欧美一区二区三区在线视频 | 欧美狠狠入鲁的视频777色| 办公室揉弄震动嗯~动态图| 一边摸一边叫床一边爽| 亚洲综合色一区二区三区| 极大满足求知欲的视频| 欧美vpswindows另类| 人妻少妇偷人精品视频| 诱人的女友bd在线|